呈淡橙黄色结晶。约250℃变暗，不熔融而发生炭化。溶于热的稀盐酸和硫磺，略溶于乙酸，酚吡啶，氢氧化碱和碳酸碱溶液，微溶于甲醇，不溶于乙醇和丁醇，不溶于醚、丙酮、氯仿和苯。在25℃水中溶解度仅0.0016mg/ml，沸水中约溶1%，1g叶酸于10ml水中的悬浮液，ph为4.8-4.8。

含叶酸的食物很多，但由于天然的叶酸不稳定，易受阳光、加热的影响而发生氧化，所以人体真正能从食物中获得的叶酸并不多。叶酸生物利用度较低，在45%左右。合成的叶酸在数月或数年内可保持稳定，容易吸收且人体利用度高，约高出天然制品的一倍左右。叶酸起初系从浸出液中提取，现在采用合成法生产。叶酸传统的合成路线是以硝基苯甲酸为原料经酰氯化、缩合 、还原、环合而成 。此工艺流程长、收率低 、生产成本高。采用四甲氧基丙醇和对氨基苯甲酰-L-谷氨酸为主要原料与三氨基嘧啶硫酸盐反应生成叶酸，总收率75%，纯度98%。